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Questions fréquentes
Technologie de Scotch de Transfert CRYO-JANE®
pour la Coupe et le Montage de Coupes de Tissus Congelés
Le système Cryo-Jane® est une technique exclusive et brevetée pour l'aide à la découpe et le montage des coupes de tissus congelés sur lame de microscope.
Epiderme de souris en HES
CRYO-JANE®

- Préserve la morphologie des tissus
- Préserve l'intégrité et la localisation des composants de la coupe pour la biologie moléculaire
- Elimine les déchirures et pertes de matériel biologique précieux
- Elimine les plis et les compressions, idéal pour une analyse parfaite et la microdissection laser Arcturus LCM
- Autorise des coupes ultra-fines (2µm)
- Procure une forte attache de la coupe à la lame, même pour les tissus gras
- Est d'une utilisation simple et rapide, adaptée à la routine
Principe de la Technique CRYO-JANE®
La technique CRYO-JANE® repose sur un scotch adhésif qui permet de transporter la coupe du bloc de tissu jusqu'à la lame de microscope.
Les opérations de coupe et transfert sont simples et rapides :
 
1 Le scotch adhésif est vendu en rouleau de 400 sections détachables, prêtes à l'emploi.
Une section de scotch adhésif est détachée du rouleau puis collée sur la face avant du bloc de tissu congelé préalablement fixé sur le cryotome.
   
 
2 Le bloc est découpé. La lame du cryotome passant derrière le scotch adhésif, la coupe de tissu se retrouve retenue par adhésion sur le scotch. La coupe peut à présent être facilement transportée sans risques ni dommages. Elle reste congelée et peut être stockée dans le cryotome en attendant le montage sur lame. La manipulation est extrêmement facilitée.
   
 
3 Pour transférer la coupe de tissu sur la lame de microscope CRYO-JANE®, le scotch adhésif est appliqué, coupe de tissu en contact avec la lame maintenue dans le cryotome. Un rouleau, également maintenu au froid, est appliqué pour assurer un bon contact de la coupe sur la lame. La lame repose sur un support régulé en température qui assure les conditions idéales d'adhésion de la coupe de tissu sur la lame.
   
 
4 La lame est placée sous la lampe UVs, toujours dans le cryotome et est exposée au UVs (360 nm) durant un bref instant d'environ 8 msec. La lame cryoJane® possède un polymère à sa surface qui durcit sous l'action des UVs et crée des liens forts entre la lame et le tissu. La lampe ne peut fonctionner que capot baissée sur la lame, procurant ainsi une protection élevée pour l'opérateur.
   
5 Le polymère durci, la coupe de tissu est parfaitement fixée sur la lame. Le scotch adhésif peut être retiré.
La coupe de tissu peut ensuite être déshydratée ou séchée au cryostat ou encore séchée à l'air avant fixation et coloration.
Le polymère est résistant à tous types de solvants et colorants pouvant être utilisés dans les procédures spéciales ou de routine en histologie classique ou moléculaire.
Durant tout le process, la coupe de tissu est restée parfaitement congelée pour une meilleure morphologie, des colorations plus contrastées pour un diagnostic plus facile.
   
 
6 Une fois votre travail de coupe terminée, de l'huile de protection maintenue à une température de -8°C dans un bain thermostaté installé dans le cryotome est appliquée sur la face avant du bloc. En se solidifiant, l'huile forme une couche de protection empêchant la déshydratation de l'échantillon lors du stockage à faible température. Ainsi protégé, votre échantillon peut être stocké sans emballage surabondant dans votre congélateur pour de longues périodes. Lors de la prochaine utilisation, il suffit de surfacer le bloc afin de mettre à jour à nouveau l'échantillon.
Merci de patienter pour la démonstration en ligne
1. Congélation et encapsulation en cryoconservateur ;

2. Découpe - Vue sur le Cryo-Vac-Away ;

3. Transfert sur la lame ;

4. Polymérisation ;
5. Retrait du scotch ;

6. Lame prête pour la fixation et la coloration ;

7. Foie de souris en H&E.
CRYO-JANE® préserve la morphologie des tissus

Le scotch, en adhérant à la surface du bloc congelé, évite les déformations que peut entraîner le passage de la lame du cryotome.
Par ailleurs, la coupe de tissu étant retenue sur le scotch adhésif, celle-ci est protégée des déformations pouvant survenir jusqu'au montage sur la lame CRYO-JANE®.

CRYO-JANE® préserve l'intégrité et la localisation des composants de la coupe pour la biologie moléculaire

L'ensemble des opérations de la technique CRYO-JANE® est réalisé à l'intérieur du cryotome.
Les accessoires et consommables, scotch adhésif, lame de microscope et rouleau, sont stockés à l'intérieur du cryotome.
Grâce à ces précautions, la coupe de tissu est préservée congelée jusqu'à son montage sur la lame, la lame montée étant stockée dans le cryotome jusqu'à fixation, séchage ou autre opération de traitement.
La technique CRYO-JANE® élimine les risques de décongélation et la formation d'eau qui provoque la solubilisation de certaines molécules pouvant entraîner leur dégradation totale ou partielle, leur déplacement au sein de la coupe de tissu faussant les interprétations, voire leur lavage hors de la coupe dès la première étape de traitement en colorant ou autre solvant.
Les résultats sont encore améliorés en utilisant le kit de congélation rapide de vos prélèvements GENTLE-JANE®. ALPHELYS vous propose ainsi un ensemble de solutions pour préserver vos échantillons congelés depuis le prélèvement jusqu'à la biologie moléculaire.
CRYO-JANE® élimine les déchirures et pertes de matériel biologique précieux

Le scotch adhésif CRYO-JANE® maintient l'intégrité du tissu lors de sa coupe et de son transfert sur lame. Il élimine les risques de déchirures dus à un défaut de lame de cryotome, un tissu fragile, etc., et qui peuvent rendre les interprétations difficiles.
Il élimine les essais répétés pour obtenir une bonne coupe et vous aide à préserver vos échantillons précieux. Le scotch de transfert CRYO-JANE® vous permet de gagner du temps en vous permettant de réussir votre coupe à chaque fois.

CRYO-JANE® élimine les plis et les compressions, idéal pour une analyse parfaite et pour la Microdissection Laser Arcturus LCM

Le scotch adhésif CRYO-JANE® adhère parfaitement au bloc de tissu congelé, éliminant ainsi les risques de plis qui peuvent se former lors de la coupe ou lors du transfert de la coupe de tissu sur la lame de microscope.
Le scotch adhésif CRYO-JANE® permet ainsi de préparer des coupes de tissu parfaitement planes et non comprimées, idéales pour les travaux de microdissection laser sur Arcturus Pixcell LCM en vous garantissant un contact parfait entre votre coupe de tissu et la Capsure® standard de votre instrument de microdissection. Une coupe plane est particulièrement recommandée pour les microdissections de cellules isolées ou de petites structures telles que des épithéliums.
CRYO-JANE® autorise des coupes ultra-fines (2 µm)

Le scotch adhésif CRYO-JANE® renforce le tissu en adhérant parfaitement à sa surface et vous permet de préparer des coupes plus fines qu'habituellement, jusqu'à 2 µm. Une coupe plus fine peut vous apporter des avantages dans la coloration (plus rapide), l'analyse (plus précise) ou l'exploitation de votre coupe avec d'autres techniques telles que la FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) où la finesse de la coupe peut faciliter la pénétration des sondes génomiques ou encore la PCR In Situ.

CRYO-JANE® procure une forte attache de la coupe à la lame, même pour les tissus gras

L'adhérence des coupes de tissus varie de façon très significative en fonction du tissu étudié et contraint à des précautions particulières quant aux conditions expérimentales de marquage de la lame, le type de lame, etc.
Les lames CRYO-JANE® sont recouvertes d'un polymère qui durcit sous exposition aux UVs et procure une attache extrêmement forte de la coupe de tissu sur la lame que le tissu soit fortement gras ou aqueux.
Le polymère, une fois durci, est résistant aux protéases, solvants alcalins et acides et la plupart des solvants organiques.
La technique CRYO-JANE® préserve vos coupes de tissus pour une exploitation maximale.

CRYO-JANE® est d'une utilisation simple et rapide, adaptée à la routine

La technique CRYO-JANE® est disponible sous forme d'un kit prêt à l'emploi incluant les accessoires et un premier jeu de consommables. Les consommables peuvent ensuite être achetés séparément.
Dès lors la technique prise en main, son utilisation s'avère très simple et rapide.
La technique CRYO-JANE® ne nécessite aucun entretien particulier et peut s'adapter sur la plupart des cryostats existants actuellement. Il suffit de nous préciser la marque et le modèle de votre cryostat à la commande.
Matériels et accessoires

Kit CryoJane® de scotch de transfert pour tissus congelés.
   
Pour commander
Le kit est livré complet avec :
- Un rouleau de sections de scotch adhésif pour 400 coupes ;
- 125 lames pré-traitées ;
- Une lampe à UV ;
- Un roller.

Merci de spécifier votre modèle de cryostat avant de passer commande.

Référence 02-CJ
   
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Accessoires
Supports de blocs congelés
Ce type de support muni d'un profond relief procure une accroche forte pour les blocs de tissus ou de cryo-préservateur congelés.

Référence BH.
   
Adaptateur pour mâchoires de microtome
Permets l'adaptation des supports, réf. BH Instrumedics, sur votre microtome.

Référence MA.
   
Roller à main
Requis dans le montage de coupe congelée avec le système CryoJane pour laminer le scotch adhésif sur le block avant coupe puis le scotch portant la coupe sur la lame.

Référence HR.
   
Bain thermostaté pour huile protective
L'huile est maintenue dans un bain à -8°C à l'intérieur du cryotome, ce qui prévient la décongélation de la coupe lors du passage de l'huile protectrice Instrumedics sur le bloc à couper. Les blocs de tissus congelés et protéger par cette huile peuvent être stockés 1 an dans un congélateur sans déshydratation.

Référence POA.
   
Etagère de stockage
Procure un espace de rangement des lames pré-coatées et du scotch adhésif dans le cryotome.

Référence STS.
   
Fusibles
Fusible lent 1 amp. à cour céramique pour le système CryoJane ECU.

Référence FS.
Consommables Cryo-Jane
Lames de microscope pré-coatées
Coating adhésif. Procure une accroche forte de la coupe de tissus sur la lame après polymérisation aux UVs. Permet le montage de la coupe sans décongélation.
Note : les lames 4X sont adaptées pour les tissus difficiles à accrocher ou très gras.

Référence CS1X en 125 par boîte.
Référence CS4X en 100 par boîte.
   
Scotch de transfert
Appliqué sur la face de coupe du bloc congelé avec le Roller à main, le scotch de transfert permet de capturer la coupe, facilite sa manipulation et empêche son enroulement ou la formation de plis.

Référence TW, 400 coupes par rouleau.
   
Nettoyage du couteau du cryotome
Nettoie efficacement les deux faces du couteau du cryotome sans abîmer le fil de coupe.

Référence KW, 10 nettoyages par paquet.
   
Mix pour tampon salin aqueux
Pour la préparation du fixateur aqueux qui permets la préservation des détails morphologiques des coupes congelées.

Référence AB, 2 flacons par paquet, 1 flacon reconstitue 180 ml de tampon de fixation.
   
Huile protectrice Instrumedics
Appliquée sur les faces d'un bloc congelé de tissu, elle prévient la déshydration durant les stockages long-terme. A utiliser avec un bain thermostaté installé dans le cryotome.

Référence PO.
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ALPHELYS, Ferme des Ebisoires, Impasse Paul Langevin, 78370 Plaisir - France
Tél +33 (0)1 30 07 52 95 - Fax +33 (0)1 30 07 51 56 - Email info@alphelys.com
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